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真空離心濃縮儀在寡核苷酸合成中的應用-杭州中国X站安装科技有限公司




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      真空離心濃縮儀在寡核苷酸合成中的應用

       更新時間:2026-06-26 點擊量:41

      真空離心濃縮儀在寡核苷酸合成(Oligo Synthesis)中扮演著至關重要的角色,是連接“合成"與“純化"的關鍵環節。

      寡核苷酸合成(固相亞磷酰胺法)是一個多步循環過程,每一步都涉及化學試劑的添加、反應和洗滌。合成的最終產物通常存在於含高濃度氨水、有機溶劑(如乙腈)或緩衝鹽的溶液中。在進入純化(如HPLC、PAGE、LC-MS)和後續應用(如PCR、基因組裝、藥物遞送研究)之前,必須:


      1、去除高濃度氨水

      脫保護副產物和溶劑,未除盡的氨水會幹擾後續的純化分離和質譜檢測。

      2、移除有機溶劑

      殘留的乙腈等有機相會影響色譜柱分離效果和質譜離子化效率,導致信號抑製或峰形異常。

      3、濃縮樣品

      合成後的粗品溶液體積通常較大(數毫升),需濃縮至小體積(微升級)以適應純化儀器的上樣量(如HPLC進樣環體積,通常為50-500 μL)。

      傳統方法(如氮氣吹掃、旋轉蒸發)存在處理通量低、易暴沸導致樣品飛濺、或高溫導致長鏈Oligo(>50mer)斷裂降解的缺陷。而真空離心濃縮儀通過結合 離心力、真空和可控加熱,能很好地解決這些問題。

      離心濃縮技術的優勢

      真空離心濃縮儀在寡核苷酸合成中的核心優勢,在於它能夠以溫和、高效且無交叉汙染的方式,完成從粗產物到純化前樣品的關鍵過渡。它利用真空環境顯著降低氨水和有機溶劑的沸點,從而在低溫(通常低於40℃)條件下快速蒸發溶劑,這很好地保護了對熱敏感的寡核苷酸(特別是長鏈和帶有熒光標記的序列)免受降解。同時,其高通量設計能兼容96孔板或離心管,一次運行即可處理數十至數百個樣品,大幅提升了從合成到純化的整體通量。更重要的是,運行過程中離心力確保樣品始終安穩地沉積於管底,有效防止了溶劑暴沸引發的樣品飛濺和交叉汙染,為後續獲得高純度的寡核苷酸產品提供了堅實保障。

      1、溫和濃縮

      在真空環境下,氨水和乙腈/水共沸物的沸點大幅降低,可在室溫至40℃的低溫環境下快速蒸發溶劑,保護對熱敏感的合成產物(特別是帶有熒光標記或磷酸化修飾的Oligo),防止其降解。

      2、高通量處理

      適配96孔板或384孔板,可在單次運行中濃縮成百上千個樣品,大幅提升合成與純化的通量。

      3、防交叉汙染

      離心力使樣品始終沉積於管底,溶劑蒸汽被冷阱捕獲,有效防止了暴沸導致的樣品交叉汙染。

      4、兼容性強

      可輕鬆處理含有機溶劑(乙腈、氨水)和水相的混合溶液。

      應用流程

      在寡核苷酸固相合成與氨水脫保護完成後,首先將含有目標產物、氨水及有機溶劑的粗品溶液轉移至真空離心濃縮儀專用的離心管或96孔板中;隨後,設備在真空環境下通過溫和加熱(通常低於40℃)快速蒸發去除體係中的氨水和乙腈等揮發性溶劑,使樣品濃縮至微升級體積;濃縮後的樣品即可直接用於HPLC或PAGE進行純化分離;最後,將純化後收集的目標產物餾分再次置於濃縮儀中,去除含水流動相,以獲得幹燥的寡核苷酸粉末或高濃度溶液,用於後續定量、質檢及下遊生物學應用。

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      1、合成與脫保護

      合成完成後,用氨水將寡核苷酸從CPG載體上切割下來,同時脫除堿基保護基。

      2、初次濃縮

      將粗產物溶液置於真空離心濃縮儀中,去除大部分氨水和有機溶劑。

      3、純化

      濃縮後的樣品即可用於HPLC或PAGE進行純化。

      4、二次濃縮

      純化後的收集餾分(含目標Oligo的水溶液)再次進行離心濃縮,去除流動相,得到幹燥的寡核苷酸粉末或高濃度溶液,用於後續凍幹或直接使用。

      中国X站安装離心濃縮儀

      中国X站安装真空離心濃縮設備可同時處理多個樣品,無需擔心交叉汙染。係統內程序可設定至多30個,主機配備樣品在線成像係統,可在運行過程中觀察樣品濃縮狀態,並根據不同的樣品對整機的真空度進行調節。設備采用皮拉尼真空計可實時顯示腔體內的真空度,並保證真空度的真實性。根據不同的樣品可對整機轉速進行調節,配備實驗室智能互聯及遠程操控係統及智能雲端故障排查係統,手機app可直接操控機器對主機遠程進行腔體預熱,溫度和真空度以及轉速可實時在app顯示。



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